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科玛嘉李斯特菌显色培养基使用说明书
组分
科玛嘉李斯特菌显色培养基和增补剂各一瓶。
基础培养基:琼脂 15.0 g/L 蛋白胨和酵母粉 23.0 g/L 氯化钠 5.0g/L
色素8.5 g/L
增 补 剂:9.0 g/L
pH值 7.0
操 作
1、基础培养基:取瓶内干粉51.5 g溶于1000 mL去离子水的洁净三角瓶中,充分搅拌混匀。也可根据需要按照51.5 g/L的比例扩大或缩小制备培养基的量。将溶解*的培养基高压灭菌(121℃,15min)。
2、增补剂:取增补剂9g加入40ml无菌水中(可根据需要按照9g/L的比例扩大或缩小制备增补剂的量),用磁力搅拌器快速搅拌(700 rpm~1000rpm)均匀(时间不少于30分钟),切勿加热,使其*溶解,最终成为奶油状的匀质溶液。
3、把混匀后的增补剂加入到冷却至47℃的基础培养基中,在1~2min内轻轻摇动使其充分混匀,立即倾注平皿,使其凝固,晾干备用。注意:切勿叠放平板。
保存 该成品平板在室温可保存一天或在冰箱内贮存2周(2℃8℃,避光)。
接种
划线或涂布接种(冰箱内保存的平板使用前应恢复至室温),在36
结果
微生物(Microorganism) | 菌落颜色 |
单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes) | 蓝色,边缘整齐带有白色晕环(直径) |
其他微生物 | 蓝色,无色,抑制 |
性能及局限
部分伊氏李斯特菌(L.ivanovii)有时出现和单核增生李斯特菌相似的菌落,但是伊氏李斯特菌是食品工业中一种罕见菌。蜡样芽胞杆菌(B.cereus)可产生蓝色菌落但是菌落不规则、直径较大,可与单核增生李斯特菌区分开来。
如用于直接分离,该培养基对单核增生李斯特菌的灵敏度和特异性接近100%,但是对于阳性结果应用CHROMagar Identification Listeria显色培养基确定,或者按照CEN,ISO,AFNOR标准方法所描述做包括纯化步骤在内的标准确定试验。通过快速方法得到的阳性结果,若未按上述标准方法进行确定试验,为保证结果的*性,实验室应做相应试验以纠正结果的有效性。
贮存条件
基础干粉贮存于2℃~30℃干燥环境中,增补剂贮存于2℃~8℃环境中,在有效期前使用。
污染处理
使用过的培养基需要在121℃灭菌至少20分钟才可以按照有关规定丢弃。
附:供体外诊断使用,产品须专业人员操作。