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API20NE非发酵G-杆菌鉴定试剂盒含配套试剂

简要描述:CN2005025 API 20NE非发酵G-杆菌鉴定试剂盒(含配套试剂)25测试/盒

  • 产品型号:CN2005025
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2021-06-09
  • 访  问  量:40
详细介绍
非苛养非肠道革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒(比色法)说明书
产品名称
通用名称:非苛养非肠道革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒(比色法)
英文名称:API 20 NE
包装规格
25 测试/
预期用途
该产品用于非苛养、非肠道革兰阴性杆菌的鉴定。
该产品用于鉴定非苛养、非肠道革兰阴性杆菌(如假单胞菌属、不动杆菌属、黄杆菌属、莫拉菌属、弧菌属
和气单胞菌属等)的标准鉴定系统,包括 8 个常规试验、12 个同化试验和 1 个数据库。
检验原理
API 20 NE 试剂条由装有脱水底物的 20 个微型管构成。常规试验接种重溶培养基的盐水细菌悬液。在
培养过程中,代谢产生颜色变化,此变化可为自发或通过加入试剂显示。同化试验接种低培养基,如果它
们能够使用相应的底物,则细菌生长。依照读数表读取反应,通过参考分析曲线指标或使用鉴别软件得到鉴
别。
 
储存条件及有效期
2~8℃储存,有效期为 12 个月。
适用仪器
-
麦氏标准比浊管 (Ref. 70 900) No. 0.5
-
API 20 NE 分析鉴定系统 (Ref.20 090) apiweb™鉴定软件 (Ref.40 011) (咨询生物梅里埃)
样本要求
API 20 NE 不直接用于临床或其他标本。
按照标准微生物学技术,必须首先在适合的培养基(如胰蛋白酶解酪蛋白)上分离要鉴定的微生物。
检验方法
氧化酶试验
必须按照生产商的使用说明,进行氧化酶试验。应当在结果单上记录结果,因为它是最后图谱的一个有
机部分(第 21 个鉴定试验)。
API 20 NE 只应用于不属于肠杆菌科的非苛养革兰阴性杆菌。
1:有些非肠道的革兰阴性杆菌亦为氧化酶阴性(嗜麦芽黄单胞菌、不动杆菌)。这些微生物也可以
API 20 NE 鉴定,但必须根据其它细菌学或临床标准加以选择。
2:对营养要求多或需要适当处理注意事项的苛养微生物(如布鲁氏菌和弗朗西丝氏菌),未包含在 API
20 NE 的数据库内。必须采用其他方法排除或证实它们的存在。
试条的准备
准备一个培养盒、盘和盖子,向盘的底部倒入约 5mL 蒸馏水或去离子水【或任何不含添加剂或可能释放
气体(如氯气、二氧化碳等)的化学物的水】,创造一种湿气。在盘的边缘部分记录标本编号。(不要在盖上
记录编号,因为在操作期间它可能错位。)从各个包装中取出试剂条。将试剂条放入培养盒中。
接种物的准备
按照本产品说明书警告和注意事项段落所示,打开一安瓿 API NaCI 0.85 %培养基(2 mL),或使
用含 2 mL 不含添加剂的 0.85 %生理盐溶液。
使用吸管或滴管,通过抽吸或通过连续接触,从琼脂糖培养基上挑取 1 - 4 个形态相同的克隆。建议
使用早期培养物(18 - 24 小时)。
配制混悬液至浊度等于 0.5 McFarland。此混悬液在配制后必须立即使用。
注:调整接种物密度至 0.5 McFarland 非常重要;否则 API 20 NE 试剂条试验可能不能正确发挥功能。
特别是,较弱的接种物可能导致假阴性结果。在操作试剂条的过程中,不要接触反应杯,接种后不要将试剂
条长时间暴露空气。
试条的接种
用同一根吸管将盐水混悬液加到试验管(不是反应杯),接种试验 NO3PNPG。将试剂条稍前倾,将吸
管或滴管的顶部靠在杯的侧面,以避免管的底部形成气泡。非苛养非肠道革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒(比色法) 版本号 07615K -CN –2009/11
3
按照警告和注意事项中所示,打开 1 API AUX 培养基安瓿,向安瓿加入约 200 L 剩余的盐混悬液。
用吸管混匀,避免形成气泡。
用混悬液注满由 GLU PAC 试验管和杯。当心液面必是平的或稍凸,不能呈凹或新月形。杯子装得不
满或过满可能给出不正确的结果。
3 个下划线试验(GLUADH URE)的杯子加矿物油,直至形成凸出的新月形。
盖上培养盒,在 29°C ± 2°C 培养 24 小时(± 2 小时)。
阳性判断值
对于不同生化反应预期结果的范围,查阅本说明书末尾的鉴别表。
检验结果的解释
读取试剂条
孵育期后,通过参阅判读表,判读试剂条。
在结果单上记录所有自发反应(GLUADHUREESCGEL PNPG)。
为保护同化反应免受空气播散的污染,应当进行两个试验 NO3 TRP 的判读。要做这一点,在 NO3
TRP 试验判读期间,用培养盒盖子遮盖同化反应。
NO3 试验:
-
各加一滴 NIT1 NIT2 试剂至 NO3 杯。
-
5 分钟后,红色表示阳性反应,记录在报告单上。
-
由于氮气的产生(表现为存在小气泡)有可能引起阴性反应:加 2~3 mg Zn 试剂到 NO3杯中。
-
5 分钟后,保持无色的杯子表明阳性反应,记录在报告单上。如果杯子变为粉红色,反应为阴性,因为管
中存在硝酸盐,被锌还原为亚硝酸盐。
用于细菌鉴定的反应是硝酸盐还原。当上述二个反应(产生 NO2 N2)中的任何一个为阳性时,硝酸盐
还原反应为阳性。
但是,N2的产生则可单独用作补充试验(参阅分析图谱索引)。
检测:
1 JAMES 试剂。立即发生反应:全杯出现粉红色表明阳性结果,记录在结果单上。
同化试验:观察细菌生长。不透明杯子表明阳性反应。
偶尔,1 个杯子显示为弱生长。在这种情况,通过与试剂条上的其他试验强度比较,结果应当记录为 或
±
注意:
一旦进行了上述判读,如解释段落中所示,鉴定是可能的。在下列情况,必须重新孵育:
-
无区别
-
无法接受或可疑的图谱;
-
如果对获得的图谱标注了以下备注:
48 小时孵育前鉴定是无效的
使用习惯或滴管,通过抽吸吸走 NIT 1NIT 2 JAMES 试剂,立即用矿物油掩蔽试验 NO3 TRP,以便形
成凸的新月形。在 29°C ± 2°C 重新孵育 24 小时,除了只应在 24 小时判读的前 3 个试验(NO3TRP GLU),
其余试验再读一次结果。
说明:
采用数字谱获得鉴定。
测定使用率:
在结果表上,将结果分成 3 组,每组标记为编号 12 4。在每组内加阳性反应相应的数字,得到一个
7 位数;氧化酶反应构成第 21 个反应,如果为阳性则数值为 4
鉴定:
这采用数据库(V7.0)进行
*
棒状杆菌鉴定用编码册
-
查找图谱中的数字谱。

 


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