弧菌显色平板的使用经验分享
弧菌显色平板是一种应用十分广泛的培养基,用于水产品及食物中毒样品中弧菌特别是副溶血性弧菌的分离和鉴定。
检验原理:
蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;蔗糖为可发酵的糖类;抑菌剂抑制大部分非弧菌细菌,氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;混合色素与副溶血性弧菌、霍乱弧菌和创伤弧菌所对应的酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团,在淡黄色平板上产生品红色菌落(副溶血性弧菌)和绿-蓝绿色的菌落(霍乱弧菌和创伤弧菌)。
弧菌显色平板的实验内容:
1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查
2.干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物
3.高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查
4.过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌
弧菌显色平板注意事项:
1.使用琼脂糖需要加温,请做好必要的防护措施,避免烫伤。
2.强烈建议您不要将琼脂糖粉末直接倒入沸水中,这样做会引起爆沸,溅出,致使浓度下降,还会造成结块而融化困难。正确的做法是称量一定量琼脂糖至三角瓶中,根据配制浓度加入一定量的缓冲液(与电泳缓冲液),加盖硅胶塞(防止温度差别造成表面结膜),微波或其他方式加热至沸腾2分钟左右,戴手套小心取出,摇匀,使之*溶解。
3.保证琼脂糖*溶解,否则造成电泳条带不清,保证*溶解的前提下,尽量缩短加热时间。