临床送检样本中,革兰阴性菌是感染筛查中检出率较高的一类微生物。这类微生物种类繁多,不同菌种对应的致病特点和药物耐受特征差异明显,快速完成准确菌种识别,对感染溯源与后续药敏评估有着重要意义。依靠传统手工生化鉴定,需要依次开展多项生化反应,操作步骤多,等待时间长,遇到生化反应特征不典型的菌株,鉴定难度会进一步提升。梅里埃VITEK 革兰阴性菌鉴定卡(GN)将多种生化反应整合在一个检测单元内,同步完成多项生化测试,依靠系统读取反应信号完成菌种比对。
革兰阴性菌的生化反应类型丰富,不同菌种在糖代谢、酶产生、底物分解等方面存在各自特征,这些特征可以作为菌种区分的依据。自动化鉴定载体内置一系列生化底物,当纯化后的待测菌悬液加入载体微孔,在合适的孵育环境中,菌株产生的酶会和各个底物发生反应,产生光学信号变化。检测设备采集全部微孔的信号,和数据库内储存的菌种生化特征图谱进行比对,输出对应的鉴定结果与匹配概率。
菌悬液制备环节,是影响鉴定结果的关键节点。制备菌悬液需要选用经过纯化的单菌落,样本内混入杂菌会带来多种代谢信号,干扰图谱匹配,造成鉴定错误。菌悬液浊度要控制在合适区间,浊度超标,菌体代谢过快,生化反应提前出现;浊度不足,反应信号微弱,仪器无法采集足够有效数据,容易出现低置信度结果。完成菌悬液制备之后,需要尽快上样检测,长时间放置会改变菌体活性,影响生化反应。
孵育环境的稳定同样不可忽视。温度变化会影响细菌酶活性,改变生化反应速率,造成反应信号和数据库参考图谱出现偏差。孵育结束后,系统自动读取信号,不需要人工逐孔判读颜色变化,减少人为判断带来的主观误差。当菌株匹配概率偏低时,检验人员需要结合涂片镜检、标本来源信息综合分析,必要时选择其他试验方法补充验证。
梅里埃VITEK 革兰阴性菌鉴定卡(GN),是针对革兰阴性菌设计的自动化生化鉴定载体,适配自动化检测平台完成菌种识别。在临床微生物实验室日常标本检测中,大量来源于尿液、痰液、血液、创面的样本,常检出革兰阴性菌,借助该鉴定卡,实验室可以高效完成菌种鉴定,减少手工生化试验的工作量,加快检验报告出具节奏。
自动化鉴定载体有自身适用范围,它依托数据库内已收录的菌种生化特征,对于罕见、变异的菌株,数据库缺少对应的特征图谱,可能无法给出可靠鉴定结论。遇到这类情况,不能单一采信鉴定输出结果,要结合临床背景,选用其他鉴定手段进一步确认。
菌种鉴定是感染诊断流程里重要一环,自动化鉴定载体利用标准化生化反应组合,简化革兰阴性菌鉴定流程,在规范操作的前提下,为实验室提供稳定的菌种识别方案,支撑感染疾病的实验室诊断工作。