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梅里埃 API20E肠杆菌鉴定试剂盒

简要描述:货号:20100 货品名称:肠杆菌和其它非苛养革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒(比色法) 规格:25条/盒

  • 产品型号:20100
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2020-10-15
  • 访  问  量:3901
详细介绍


REF 20 100 / 20 160 07584E - CN - 2004/05
® 20 E
肠杆菌和其它革兰氏阴性杆菌鉴定系统
概要说明
API 20 E 是肠杆菌科和其它非苛养 G-杆菌的标准鉴定系
统 包括 21 个标准化微型生化测试和鉴定资料库 可鉴定
的菌谱名录 请参考说明书后的鉴定表
原理
API 20 E 试验条是由 20 个含干燥底物的小管所组成 这些
测定管用细菌悬浮液接种 培养一定时间後 通过代谢作
用产生颜色的变化 或是加入试剂後变色而观察其结果
根据说明表判读反应 参照分析图索引或使用鉴定软件得
到鉴定结果
试剂盒内容物
25  测试试剂盒 ( 货号. 20 100)
- 25 API 20 E 试条
- 25 培养盒
- 25 结果报告单
- 1 个封口夹
- 1 份产品说明书
100 测试试剂盒 ( 货号. 20 160)
- 100 API 20 E 试条 (4x25 试条)
- 100 培养盒
- 100 结果报告单
-  1 个封口夹
-  1 份产品说明书
试条的成分
API 20 E 试条的成分请参阅说明书后的结果判读表
必需但未提供的试剂和材料
试剂
- 0.85 % API NaCl 培养基 5 ml (Ref. 20 230) or
API 悬浮培养基 5 ml (Ref. 20 150)
- API 20 E 附加试剂盒 (Ref. 20 120) 或
单个的附加试剂  TDA (Ref. 70 402)
JAMES (Ref. 70 542)
VP 1 + VP 2 (Ref. 70 422)
NIT 1 + NIT 2 (Ref. 70 442)
- Zn 试剂 (Ref. 70 380)
- 氧化酶 (Ref. 55 635*)
* 目录中没有销售的国家 请使用相近的试剂
- 矿物油 (Ref. 70 100)
- API 20 E 数值分析图谱(Ref. 20 190) 或
鉴定软件 
材料
- 吸管或 PSI 管
- 安瓿开启器
- 安瓿架
- 微生物实验室一般设备
可能需要的附加试剂
- API OF 培养基 (Ref. 50 110) :
用于测定发酵型或氧化型代谢作用
- API M 培养基 (Ref. 50 120) :
用于测定兼性厌氧菌的运动性
警告和注意
•  仅供体外诊断和微生物质控使用
•  仅供专业人员使用
• 此试剂盒中含有动物源性成分 已知所使用原始材料和动
物的卫生状况不能完全保证其不含传染性的物质 因此我
们建议所有样品应被视为具有传染性 并应按通常的安全
措施对其进行正确处理 勿吸入或咽下
• 所有标本 细菌培养物 接种物应被视为 具有传染性并
应进行正确处理 在整个试验过程中 要遵守无菌技术要
求和通常使用的防范措施 可参照 NCCLS M29-A 保
护试验室工作人员免受仪器生物公害和通过血液 体液
组织传染的疾病的侵害-当前版本 的内容 另外的防护
措施 可参照 微生物和生物医学实验室的生物研究安全
-CDC/NIH – 新版本 或参照各国正在使用的规章执

• 不要使用过期的试剂
• 使用前 请检查包装和成分是否完整
• 不要使用已经破损的试条 杯子破坏 干燥剂小袋已打开

• 有关产品性能的数据均由严格按照作步骤所进行的试验得
出 任何操作步骤的改变或偏离均会影响试验结果
• 试验结果的判断应由合格的微生物家所作 同时应将病
史 标本来源 菌落和显微形态考虑在内 如有可能 再
作一些附加试验 尤其是抗生素敏感谱
储存条件
试验条采用铝袋包装并附有干燥剂
一旦打开铝袋(*) 请使用封口夹(试剂盒已含有)重新封口
以保证试条的干燥 把铝袋撕开处末端放入打开的夹子并
小心的加紧两端 开启铝袋后 在 2-8 环境下 试验条可
享有 10 个月的有效期(或包装盒上的有效期 以较短时间
为准)
(*) 建议开封的方法 在封口下方剪开铝箔装 为防止意外
损坏干燥剂 开封时应保持铝箔袋垂直
标本  采集和前处理
API 20 E 不能直接用于临床或其他标本
需要进行鉴定的微生物必须首先根据标准微生物处理技术
于适合肠杆菌和/或非苛养革兰氏阴性杆菌的培养琼脂 例
如 麦康凯 上培养分离
IVD
PDF 文件使用 "pdfFactory" 试用版本创建 
api ® 20 E  07584E –  CN - 2004/05
bioMérieux ® SA 中文 - 2
使用说明
氧化酶试验
必须按照制造商的使用说明进行氧化酶试验 由于它是
终图谱的主要数据 请将其记录于结果报告单上 第二十
一个试验
试条的准备
• 准备一个培养盒 盘和盖子 倒入约 5ml 蒸馏水或软化
水[或其它不含杂质或产生挥发性气体的化学物质 如
Cl2, CO2,等 ]于盘的蜂窝小凹中 造成一个湿室
• 在盘的沿边写上菌株号(不要写在盖上 以免错放)
• 从包装中取出试验条放到盘中
• 将试条置于孵育箱内
注意 API 20 E 只能用于肠道细菌和或非苛养的 G- 杆菌
苛养菌主要指对营养需求有特殊需要的菌(例 布鲁氏菌属
Brucella 和 法朗西丝菌属 Francisella) 这些菌没有包括在
API 20 E 数据库中 必须采用有效方法 排除这些菌的存

接种物的准备
• 根据"警告及注意"一栏所列方法打开一安瓿 API 0.85%
NaCl 培养基 (5ml)或一安瓿 API 悬浮培养基(5 ml) 或
使用 5ml 0.85 %无杂质 无菌盐水
• 用吸管或接种针从分离物的平板上挑取单个分纯菌落至悬
浮基物中 建议使用新鲜培养 18-24 小时
• 仔细研匀以达到均一的细菌悬液
制备好的菌悬液必须立即使用
注意 大多数弧菌 Vibrio 均嗜盐 如怀疑菌株为弧菌
请使用 0.85% NaCl (5ml) 培养基
试条的接种
• 用同一根吸管 将菌悬液充满 CIT VP 和 GEL 管
的管部和杯部
• 其它管仅充满管部(不是杯部)
• ADH, LDC, ODC, H 2 S 和 URE 管 用矿物油覆盖 以形
成厌氧环境
• 盖上培养盒
• 于 36°C ± 2°C 孵育 18-24 小时
判读和解释
试条的判读
• 孵育后 根据使用手册中的读数表判读各反应结果
• 如果 3 个或 3 个以上测定 GLU 试验+或- 为阳性结果
记录所有自发反应于结果报告单上并观察需要附加试剂的
试验的结果
- TDA 试验 加 1 滴 TDA 试剂  深褐色为 阳性反应 记
录于报告单上
- IND 试验 加 1 滴 JAMES 试剂 反应立即发生  粉红
色出现在整个反应应管者为 阳性 记录于报告单上
- VP 试验 加 1 滴 VP 1 和 1 滴 VP 2 试剂 至少等待
10 分钟  浅粉或 红色表明为 阳性结果 记录于报告单
上 如 浅粉红色在 10 至 12 分钟内出现 判断结果为 阴

注意 吲哚产生试验必须后进行 因为该反应释放的气
体产物会干扰试条的其他试验 在加入附加试剂后 请小
心勿调换培养盒盖
• 如果加入附加试剂前阳性结果 包括 GLU 试验 的数量
少于 3 个
- 重新培养 24 小时 ± 2小时 且不要加任何试剂
- 重新进行需要加入附加试剂的测试 如前说明
- 为了完成鉴定 可能需要进行补充试验 参考有关鉴定
的段落
解释
鉴定结果从 数字索引中获得
• 所得的反应结果编为数字图谱
所得反应的类型必须以数字化形式记录在报告单 每 3 个
测定为一组 每个以 1 2 和 4 标明 在每组中 阳性反
应以相应的数字相加 由 API 20 NE 的 20 个测定可得一
个 7 位数 氧化酶反应构其第 21 个反应 如阳性则为
4
• 鉴定
使用数据库 (V4.0)进行鉴定
* 根据数字图谱
- 从使用手册的读数表中寻找数字图谱
* 使用鉴定软件
- 在键盘上输入 7 位阿拉伯数字的图谱
在某些情况下 7 位数检索编码还不能区分细菌 必须进行
以下一些补充试验
- 硝酸盐还原到亚硝酸盐(NO2)和氮气(N2) 各加一滴 Nit
1 和 Nit 2 试剂于葡萄糖 GLU 管内 待 2~3 分钟后  红
色表示 阳性结果(NO2) 阴性反应 黄色 可能由于还原
至 N2 有时还有气泡 加 2-3mg 锌粉到葡萄糖 GLU
管 5 分钟后 如果管保持 黄色表示 阳性结果(N2) 记录
于报告单 如果测定变 粉红 这明是 阴性反应 硝酸盐仍
留管内 被锌粉还原 该反应用于检测革兰阴性 氧化酶
阳性的杆菌
注意 出于和吲哚试验同样的原因 参考 试条的判读
中的注意项 硝酸盐还原试验必须后进行
- 动力 (MOB) 接种一安瓿 API M 培养基 参见产品说明

- 麦康凯 MacConkey 培养基生长实验(McC) 接种一个
麦康凯 MacConkey 平板 参见产品说明书
- 葡萄糖氧化 (OF-O) 接种一安瓿 API OF 培养基 参见
产品说明书
- 葡萄糖发酵 (OF-F) 接种一安瓿 API OF 培养基 参见
产品说明书
这些在数值编码本开始部分有所介绍的补充试验 可以组
成 9 位数的数值索引 从而可以用鉴定软件获得鉴定结

5 315 173 (57) Enterobacter gergoviae
如果分辨率很低 提议进行进一步的试验 请参考鉴定软
件或数值分析索引
PDF 文件使用 "pdfFactory" 试用版本创建 
质 量 控 制
培养基 试验条和试剂在有效期内不同阶段需作系统的质量控制 对进行质控实验室 推荐标准菌株 1.  大肠埃希菌
Escherichia coli ATCC ® 25922 或以下菌株之一
2.  嗜麦芽糖寡养单胞菌 Stenotrophomonas maltophilia
ATCC 51331
3.  阴沟肠杆菌 Enterobacter cloacae
ATCC 13047
4.  奇异变形杆菌 Proteus mirabilis
ATCC 35659
5.  肺炎克雷伯菌肺炎亚种 Klebsiella pneumoniae ssp
pneumoniae  ATCC 35657
ATCC : American Type Culture Collection, 10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209, USA.
ONPG ADH LDC ODC CIT H 2 S URE TDA IND VP GEL GLU MAN INO SOR RHA SAC MEL AMY ARA NO 2 N 2 *
1. + – + + – – – – + – – + + – + + – + – + + –
2. + – V – V – – – – – + – – – – – – – – – – –
3. + + – + + – – – – + – + + – + + + + + + + –
4. – – – + V + + + – – V + – – – – V – – – + –
5. + – + – + – V – – V – + + + + + + + + + + –
* ATCC 13047 和 ATCC 25922 菌株可能会观察到 N 2 (+)结果
• ATCC 51331 菌株于胰酶大豆血琼脂上孵育 24-48 小时 可以获得反应图谱
• 其他的菌株于胰酶大豆血琼脂上孵育 18-24 小时 可以获得反应图谱
• 请使用 API NaCl 0.85 % 培养基制备菌悬液
根据当地相应的规定进行质量控制是使用者的责任
方法 的 局限 性
• API 20 E 鉴定系统能准确鉴定在鉴定范围 请查阅该说
明书后的鉴定表 内的肠道细菌和非苛养 革兰氏阴性杆
菌菌种 但不能用于鉴定/排除鉴定范围外的微生物
• 由于在反应原理上 API 技术与传统技术间存在差异 有可
能出现与常规方法不同的生化反应结果 同时由于所用底
物的差异亦造成阳性反应百分比的不同
• 在某些非常罕见的情况下 某些微生物如克雷伯菌属
Klebsiella 或变形菌属 Proteus 与葡萄糖的反应可
能会由阳性转变为阴性 例如可以观察到蓝绿色变化 这
个反应将记录为阴性反应 这种情况已经被反映到鉴定表
中的鉴定百分率上
• 如 果 鉴 定 为 沙 门 菌  Salmonella  或 志 贺 菌
Shigella 请进行血清学鉴定以确认鉴定结果
• 分离自胆囊纤维化病人的非发酵革兰阴性杆菌可能会产生
不典型的生化图谱 影响鉴定的结果
• 必须使用单个微生物的纯培养
预 期 值范围
参阅在本说明书尾部的 反应鉴定表 以取得有关各种生
化反应阳性率的资料
性能
• 肠杆菌
对共 5514 株 本产品鉴定范围内的 不同来源的临床及
收藏菌株鉴定结果显示
- 92.80 % 的菌株可被准确鉴定 需要或不需附加检测
- 4.61 % 的菌株无法鉴定
- 2.59 % 的菌株被错误鉴定
• 其它非苛养革兰阴性杆菌
对共 2386 株 本产品鉴定范围内的 不同来源的临床及
收藏菌株鉴定结果显示
- 90.32 % 的菌株可被准确鉴定 需要或不需附加检测
- 6.16 % 的菌株无法鉴定
- 3.52 % 的菌株被错误鉴定
废 物处理
所有使用或未使用的试剂和其他污染性材料应遵循传染性
或潜在传染性产品的处理程序
每个实验室都有责任根据其实验的类型和危险性级别进行
废物和污物的处理 同时要严格依照有关的规定对待和处
理所有的废物和污物
担保
生物梅里埃 bioMérieux 拒绝任何形式的担保 明确的或暗
指的 包括任何暗含的商业性和具有特殊用途适用性的担
保 生物梅里埃 bioMérieux 将不对任何偶然的和相因而生
的损害承担义务 生物梅里埃也不会对任何使用者提出的
超过其用于支付购买生物梅里埃产品或服务的偿还要求承
担义务

结 果 判 读 表
结果
试验 有效成分

(mg/cup.)
反应/ 酶
阴性 阳性
ONPG
邻硝基苯-半乳糖苷
0.223
β-半乳糖苷酶 无色 黄色(1)
ADH 精氨酸 1.9 精氨酸双水介酶 黄色 红/橙色(2)
LDC 赖氨酸 1.9 赖氨酸脱羧酶 黄色 橙色(2)
ODC 鸟氨酸 1.9 鸟氨酶脱羧 黄色 红/橙色(2)
CIT 柠檬酸钠
0.756
柠檬酸利用 淡绿/黄 兰绿/兰(3)
H2S 硫代硫酸钠 0.075 H2S 产生 无色/微灰 黑色沉淀/细线
URE 脲素 0.76 脲酶 黄色 红/橙色(2)
TDA /立即
TDA 色氨酸
0.38
色氨酸脱氨酶
黄色 深褐
JAMES / 立即
IND 色氨酸
0.19
吲哚产生
无色/浅绿/黄色
粉红
VP 1 + VP 2 / 10 分钟
VP 丙酮酸盐 1.9
3-羟基丁酮产生乙酰甲基甲

无色 粉红/红色 (5)
GEL
Kohn 明胶 0.6 明胶酶 黑色素不扩散 黑色素扩散
GLU
葡萄糖
1.9 发酵/氧化(4)
兰/兰绿 黄色
MAN
甘露醇
1.9 发酵/氧化(4)
兰/兰绿 黄色
INO
肌醇
1.9 发酵/氧化(4)
兰/兰绿 黄色
SOR
山梨醇
1.9 发酵/氧化(4)
兰/兰绿 黄色
RHA
鼠李糖
1.9 发酵/氧化(4)
兰/兰绿 黄色
SAC
蔗糖
1.9 发酵/氧化(4)
兰/兰绿 黄色
MEL
密二糖
1.9 发酵/氧化(4)
兰/兰绿 黄色
AMY
苦杏仁苷
0.57 发酵/氧化(4)
兰/兰绿 黄色
ARA
阿拉伯糖
1.9 发酵/氧化(4)
兰/兰绿 黄色
OX (看氧化酶试验说明书) 细胞色素氧化酶 (看氧化酶试验说明书)
(1)  出现浅黄色应判断为阳性结果
(2)  孵育 36-48 小时后 出现橙色应判断为阴性结果
(3)  读小杯顶部的结果 需氧
(4)  发酵始于小管的底部 氧化开始于杯部
(5)  10 分钟后出现的浅粉红色应判断为阴性结果
• 标示的量可能因使用原料的浓度不同而有所调整
• 某些杯含有动物源性产品 特别是蛋白胨

 

 


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