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    产气荚膜梭菌的5种保藏方法

    点击次数:980 发布时间:2019-06-12
       产气荚膜梭菌的5种保藏方法
      产气荚膜梭菌为厌氧芽孢菌,是引起食源性胃肠炎常见的病原之一。能产生10余种外毒素,有些外毒素即为胞外酶。4种主要毒素中,α毒素(卵磷脂酶)毒性较强,各菌型均能产生,在气性坏疽的形成中起主要作用。此外,很多A型菌株还能产生肠毒素,引起食物中毒。易于形成芽孢,芽孢的热抵抗力很强,由患者粪便中分离的芽抱能耐受100℃1-5h的加热。除了具有形成芽抱及耐热等特点之外,生化性状、毒素及酶的特异性等与其他魏氏梭菌是一致的。
      这种毒素对人致病的主要为A型,A型很容易从外环境中分离到,属人和动物肠道正常菌群;B-E群在土壤中不能存活,主要寄生于有免疫力的动物肠道内。食品中污染该菌到一定数量(1.0×107或更多时)往往在摄食后才能在肠道中生产毒素引起食物中毒。潜伏期约10h,临床表现为腹痛、腹胀、水样腹泻;无热、无恶心呕吐。产气荚膜梭菌广泛分布存在于土壤、人和动物肠道中,经常在人和许多家养及野生动物的肠道中发现该细菌的芽孢。牛肉、猪肉、羔羊、鸡、火鸡、炯肉、红烧蔬菜、炖肉和肉汁中常常能够分离到产气荚膜梭菌。因此,引起食物中毒的食品大多是畜禽肉类和鱼类食物以及加热不彻底的牛乳。此外,不少熟食品,由于加温不够或中途污染而在缓慢的冷却过程中,菌体大量繁殖并形成芽抱产生肠毒素,其食品并不一定在色香味上发生明显的变化,但是人们误食了这样的熟肉或汤菜,就有可能发生食物中毒。
      产气荚膜梭菌的保藏方法:
      1.传代培养保藏法:又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6℃冰箱内保存。
      2.液体石蜡覆盖保藏法:是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。
      3.载体保藏法:是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。
      4.寄主保藏法:用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。
      5.冷冻保藏法:产气荚膜梭菌可分别放在低温冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等进行保存。
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