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    计数显色培养基的用法及用量说明

    点击次数:385 发布时间:2019-05-14
       计数显色培养基的用法及用量说明
      计数显色培养基是一类利用微生物自身代谢产生的酶与相应显色底物反应显色的原理来检测微生物的新型培养基。它是一种新型分离培养基,利用显色培养基进行微生物的筛选分离,其反应的灵敏度和特异性大大优于传统培养基。这些相应的显色底物是由产色基因和微生物部分可代谢物质组成,在特异性酶作用下,游离出产色基因显示一定颜色,直接观察菌落颜色即可对菌种作出鉴定。
      计数显色培养基复苏菌种前应准各适于该菌种生长的固体、液体培养基和培养设备,所有操作均应在符合生物安全保护及无菌条件下进行。启开菌种宜采用锯开法(锯开前用75%酒精棉消毒菌种管外壁)。用吸管将液体培养基0.3ml左右注入被启开的菌种安瓶中并吹打,使安瓶中的冻干菌种溶解成菌悬液。
      将上述菌悬液全部吸出,分别接种到固体斜面和液体培养管中,一般放置在37℃培养箱培养18~24小时。对需要特殊培养条件的细菌,如需5%~10%CO2或厌氧条件等,应分别于CO2培养箱或厌氧培养箱中培养。
      计数显色培养基用法:
      称取本品23.5克,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15分钟,冷却至45-50℃待用;
      倾注法:
      取适当稀释度的样品液1ml加入无菌平皿中,再加入冷却好的计数显色培养基约15ml,混合均匀,待培养基完全凝固后,36℃培养24~48h进行计数;
      涂布法:
      取冷却至45-50℃培养基,倾入无菌平皿,待培养基完全凝固后,在36℃的培养箱中倒置放置1-2小时,加入适当稀释度的样品液1ml,涂布于培养基上,36℃培养24~48h进行计数。
      操作步骤:
      1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液;
      2、取样品液1ml加入冷却至45-50℃显色培养基中混匀或涂布于平板上;
      3、36℃培养24~48h,选用有30~200个菌落的平板,计数显色培养基的计数平板上出现的红色菌落(不论其大小和颜色深浅均计数)。
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