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    李斯特菌显色培养基的操作步骤,学会没?

    点击次数:328 发布时间:2020-05-19
       李斯特菌显色培养基的操作步骤,学会没?
      李斯特菌显色培养基是根据李斯特菌的β-葡萄糖苷酶活性、鼠李糖发酵特性和磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PIPLC)活性进行的特异显色。有β-葡萄糖苷酶活性则菌落为蓝绿色,有鼠李糖发酵特性则菌落背景为黄色,有PIPLC活性则菌落周围有不透明光晕。
      李斯特菌是革兰氏阳性的短杆菌,能游动,可寄生在细胞内。它包括七个菌种,其中单核细胞增生李斯特菌是常见的感染人的肠道病原菌,在我国是奶制品等食品的常规检查项目。事实上,在肉制品中也常常发现有一定李斯特菌的污染。虽然它的致病性并不太高,但对于婴幼儿以及免疫缺陷的高危人群,它常带来严重的食品中毒事件。因此,常规检查是否存在李斯特菌污染非常重要。李斯特菌在形态上容易和链球菌、棒状杆菌相混淆。那么,如何把它鉴别出来呢?推荐使用李斯特菌显色培养基进行鉴别。
      用法:
      称取基础培养基 14.2g 加入 180ml 蒸馏水,加热溶解并不停搅拌;另取 1.2g 李斯特氏菌添加剂,加入 20ml 无菌水,并加入一些玻璃球,不停振动 1-2min,使其混合均匀,将二者分别于 121℃ 高压灭菌 15 min。冷至 50℃ 左右时,把李斯特氏菌添加剂加入基础培养基中,并加入复溶后的李斯特氏菌抑菌剂1 支,混匀,倾入无菌平皿。使培养基的厚度约为 2-3mm,这样有利观察不透明环。
      操作步骤:
      使用前,把制备好的培养基放置室温 10-20 分钟。
      1、按SN标准、GB标准、FDA标准、ISO标准或其它标准制备样品液;
      2、把样品液加入李氏增菌肉汤(LB1、LB2)中增菌;或把样品液和增菌液按照 1:10 的比例混匀,30℃ 培养 24 小时;或其它增菌液中增菌培养;
      3、取一环增菌液划线接种到李斯特菌显色培养基上,36℃±1℃ 培养 24-48 小时。
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