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    小肠结肠炎耶尔森氏菌显色培养基检验原理

    点击次数:165 发布时间:2021-12-28
      提到小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersinia enterocolitica),不可避免要蹭一下它同属姐妹--鼠疫杆菌,即鼠疫耶尔森氏菌(Yersinia pestis)的热度,作为引发令人闻风丧胆的鼠疫(黑死病)的致病菌,鼠疫耶尔森氏菌赫赫有名,相比之下,同属的小肠结肠炎耶尔森氏菌就有点小透明了。但话又说回来,在欧、美、澳洲国家,小肠结肠炎耶尔森氏菌还是有一定辨识度的,特别是在温带、寒带国家像比利时、加拿大和澳大利亚,是导致细菌性感染排位第三的致病菌,超过志贺氏杆菌,仅次于沙门氏菌和弯曲杆菌。
      蛋白胨、酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;色素与单增李斯特氏菌具有的酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团,在平板上,单增李斯特氏菌呈现绿~蓝绿色的光滑规则的小菌落;抑制剂和配套试剂可抑制杂菌的生长。
      小肠结肠炎耶尔森氏菌显色培养基使用方法:
      1.称取显色培养基干粉47.3g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,充分溶解,121℃高压灭菌15min,冷至50℃左右。
      2.取10支配套试剂分别加入1mL无菌水,使之完全溶解。
      3.将配套试剂加入到已冷至48℃左右基础培养基中,充分混匀后倾注无菌平皿。
      4.按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液,进行增菌培养后,用接种环取1环增菌液,划线接种于显色平板上,置于36±1℃培养24-48小时。
      5.观察结果。致病性李斯特24h后开始出现蓝绿色,至36~48h蓝绿色明显。挑取显色平板上呈蓝绿色光滑规则,直径约1~2mm的可疑单菌落进行进一步的试验。
      6.对疑似单增李斯特氏菌菌落可使用HK-MID Listeria或API20E或生化管进行下一步的鉴定。
      注:如产品类型为干粉,按上述1-6进行操作;若为即用型平板,按4-6进行操作即可。
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