嗜血杆菌属于菌科，是专性寄生的。属细菌主要寄生在人的咽喉及膜，少于化道和生道。其中主要引起人类性化脓感染（性咽炎、喉炎、气管炎、肺炎、中耳炎、鼻窦炎、心内膜炎、败血症、脑膜炎等）及严重的继发感染，是引起软性下疳的病原菌。本属细菌对营养要求严格，生长时需血液中存在的生长因子，人工培养时必须供给新鲜血液才能生长，故名嗜血杆菌。
嗜血杆菌，需氧或性氧，在补充5~10%CO，的大气中生长良好，适生长温度为35~37，pH7.6～7.8，在pH7.6下生长较好。生长需要又因子、V因子或二一。是一种对热稳定的，是一种含铁的卟啉，为细菌合成过氧化氢酶、过氧化物酶、细胞色素氧化酶的辅基；是一种对热不稳定的，是脱氢酶的辅酶，在细胞的呼吸中起氢的作用。红细胞中含X及V因子，但羊血红细胞中含有水解V因子的酶类，V因子性的嗜血杆菌通常不能在含有完红细胞的羊血琼脂上生长，因实验室中常用巧克力琼脂培养基上分离培养嗜血杆菌。
嗜血杆菌分离培养基以巧克力琼脂较好，其中在巧克力琼脂上的生长状况好于羊血巧克力琼脂，如兔血来源困难也可用羊血代替，但需一定量的（或）。在培养基中加入2%鲜酵母浸液和可菌落大。
呼吸道标本中的嗜血杆菌在初代培养时，受到革兰阳性细菌的抑制（营养竞争及菌素作用），菌落细小不易与其他细菌相区别，这是造成嗜血杆菌分离率低的直接原因。在培养基中加入的或（或其他兰阳性细菌抑制剂），可提高嗜血杆菌分离率。原因是，当在培养基中加入万古霉素后，革兰阳性细菌的生长，加了对嗜血杆菌的，嗜血杆菌在加万古霉素的培养基上，菌落生长较大，从而提高了嗜血杆菌的分离率。
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