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    厌氧菌及棒状杆菌鉴定卡程序性步骤讲解

    点击次数:110 发布时间:2021-11-19
      厌氧菌及棒状杆菌鉴定卡由20个具干燥底物的小管组成,可用于测定酶活性和糖的发酵。酶活性测定将浓的菌悬液接种于干燥的酶底物,使其复溶。孵育过程中,所产生的代谢终产物通过自然反应或加入附加试剂而变色。发酵试验将菌悬液接种于营养培养基中(含pH指示剂),使管内底物溶解。糖发酵结果由pH 指示剂的变化而测得。鉴定结果可根据说明书的判读表进行读出,也可参照生化谱检索手册或测定软件,得到鉴定结果。
      厌氧菌及棒状杆菌鉴定卡程序性步骤:
      1.菌落的选取,一旦要鉴定的菌株被分离并被证实为革兰氏阳性、无芽孢形成、兼性需氧-厌氧杆菌杆菌:
      1.1 记录溶血类型
      1.2 挑取一个分离较好菌落于0.3ml 的无菌水中制备均匀菌悬液。
      1.3 用该悬液注入琼脂平板中【Trypcase Soy 琼脂+5%羊血平板或哥伦比亚琼脂(加或不加CAN)+5%羊血平板上】(或用拭子涂布整个平板表面)。
      1.4 37°C 孵育24 – 48 小时
      2.试条的准备
      2.1 准备一个培养盒(盘和盖子),倒入约5ml 蒸馏水或去离子水【或任何不含添加剂或不含能产生挥发性气体(如Cl2,CO2 等)的化学物质的水】于盘的蜂窝小凹中,造成一个湿室。
      2.2 记录菌株资料于盘的长边上(不记在盖上,因为操作过程中很容易将盖子放到其它试条上)。
      2.3 从包装袋中取出试条。
      2.4 置试条于培养盒中。
      3.接种物的制备
      3.1 按产品说明书中“警告和注意”所示,打开API 悬浮培养基安瓿。
      3.2 用拭子收集所有先前准备好的传代平板上的细菌。建议使用培养24-48 小时的新鲜菌。
      3.3 制备菌悬液,浓度为6 个麦氏单位。菌悬液制备好后应立即使用。
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