产碳青霉烯酶的操作法则
产碳青霉烯酶作为细菌（尤其是革兰阴性杆菌）主要耐药机制，自1982年英国从粘质沙雷菌中分离出碳青霉烯酶以来，已陆续报道70余种碳青霉烯酶。由于产酶编码基因位于染色体或质粒上，可以快速整合至细菌中，特别是临床分离的铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对碳青霉烯类抗生素耐药率不断增高，给临床治疗和医院感染防控带来巨大的挑战。
产碳青霉烯酶具有很广泛的水解底物谱，临床一旦遇到产该酶的菌株，很难治疗，目前尚无有效药物。进行联合药敏试验，或进行联合抗菌药治疗。目前已报道的可检测产碳青霉烯酶的方法主要有EDTA协同试验、改良Hode试验、三维试验（以亚胺培南替代头孢西丁，其余操作相同）以及Etest法。
操作：
1、基础培养基：取瓶内干粉42.5g溶于1000mL去离子水的洁净三角瓶中，移取2.0ml增补剂S1加入到培养基内，充分搅拌混匀。也可根据需要按照42.5g/L和2.0ml/L的比例扩大或缩小制备培养基的量。
2、加热至100℃，不停搅拌，使其*溶解。若使用微波炉加热，应将培养基加热沸腾，立即移出，轻轻摇匀，再放入微波炉加热，观察小气泡变为大气泡，直至*溶解即可。切勿使培养基溢出。
3、增补剂S2：取增补剂S20.25g溶于2.0ml无菌去离子水中，搅拌均匀，过滤（0.45um滤膜）备用。也可根据需要按照0.25g/L的比例扩大或缩小制备增补剂的量。
4、将溶解*的增补剂S2加入到冷却至45℃~50℃的基础培养基和增补剂S1中，轻轻地摇动均匀，配制成产碳青霉烯酶的显色培养基，倾注平皿，使其凝固，晾干备用。
保存该成品平板在室温可保存一天或在冰箱内贮存1个月（2℃~8℃，避光）。
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